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Gibco胎牛血清的制備流程分四個布置

點擊次數:661 發布時間:2020-12-22
  Gibco胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
  Gibco胎牛血清的制備流程:
  1、血清來源:可從世界各國收集胎牛血清,但是必須符合他的質量標準。地方當局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說明血清質量的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗結果和交付情況。
  2、血清的收集:胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個月內)血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業生產的標準:低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。
  3、血清的制備:
  a. 超低IgG胎牛血清:通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量減到zui低,一般IgG≤5ug/ml,生物學活性不變。
  b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過氧化酶方法測定)。
  c. γ-射線照射:已經證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。而且這個劑量的γ-射線照射不會改變血清的理化性質和對細胞培養的影響。
  4、除菌過濾:經過上述處理的粗制血清再經過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要通過三層0.1微米濾膜,其他血清可通過0.2微米濾膜。
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